《表1 本研究所用到的引物》

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《利用CRISPR/Cas9技术创建OsmTERF家族基因突变体》

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根据拟南芥AtmTERF序列在国家水稻中心数据库（http://www.ricedata.cn/gene/）Blast比对获得水稻Os06g0225100、Os07g0583200（m TERF9）和Os08g0-515800（m TERF6）基因组序列和CDS序列。靶标sgRNA利用CRISPRdirect（http://crispr.dbcls.jp/）设计在外显子上，每个基因的特异引物（表1）。参照Wang等（2017）的程序，将靶标sg RNA表达盒用重叠PCR的方法合成，扩增使用的引物设计（表1）。第一轮PCR分别与U3F和tR1tR引物和g R1tF和g RNAR2引物发生两个反应，第二轮PCR分别用U3F和g RNAR2引物进行。使用pEASY-Uni Seamless Cloning and Assembly Kit将sg RNA表达盒重组到ApaⅠ和PstⅠ双酶切的phRubi2-Cas9载体上，挑取单菌落进行菌落PCR验证，并测序验证。质粒用冻融法转化导入农杆菌EH105，挑取单菌落进行菌落PCR验证。