《表1 γ-PGA对罗非鱼皮PSC自聚集速率常数的影响》

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《γ-聚谷氨酸对罗非鱼皮酶促溶性胶原自聚集性的影响》

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注：同列不同字母表示差异显著（P<0.05）。

在不同含量γ-PGA存在的条件下，罗非鱼皮PSC的自聚集动力学曲线均为S型（图1a），表明胶原仍然表现较好的自聚集能力，但是当γ-PGA/PSC达到60%及以上时，胶原自聚集动力学曲线线性增长阶段斜率逐渐降低，说明胶原自聚集速率减缓，原因主要是γ-PGA的等电点偏酸性，而胶原自聚集pH 7.4，在此条件下γ-PGA带大量的负电荷，其结合到PSC上后使得胶原所带负电荷增加、分子间静电斥力增大[21]。依据文献[7，17]的自聚集动力学理论对胶原自聚集动力学曲线进行分析（图1b和表1），结果表明在γ-PGA存在的条件下，胶原的自聚集过程仍然包含两个阶段[11]：第1阶段（成核阶段），胶原分子结构发生变化形成晶核，但吸光度并未显著增加；第2阶段（生长阶段），在晶核的基础上胶原分子进一步生长直至形成胶原纤维甚至纤维束，进而形成宏观三维网络结构[22]，表现为吸光度显著增加直至稳定。然而，在γ-PGA存在的条件下，胶原的自聚集动力学参数发生了变化。通过对所得数据进行分析，对于纯胶原来说，第1和第2自聚集阶段的分界点在10 min时，随着γ-PGA含量的增加，分界点依次为12、12、16、18 min和18 min；采用一元线性回归方法对每一阶段的数据进行拟合，发现随着γ-PGA含量的增加，胶原的成核时间逐渐延长，第1阶段的速率常数显著降低，主要与γ-PGA带大量的负电荷有关；而第2阶段的速率常数呈现先增加后降低的趋势，原因可能是γ-PGA有大量的侧链羧基，有利于增加胶原间的结合位点，因而纤维生长的速率常数是增加的，但是随着其含量的增加，负电荷带来的斥力是主要影响因素，因而速率常数降低。由表1还可以看出，第1阶段的速率常数远低于第2阶段，因此成核阶段是影响胶原自聚集性的速控阶段。图2为γ-PGA对胶原自聚集比率的影响，可以看出当γ-PGA/PSC不高于80%时，随着其含量的增加，胶原自聚集比率没有显著变化，然而当γ-PGA/PSC进一步增加到100%时，其值显著降低；而对于γ-PGA来说，其自聚集比率是随着含量的增加而显著增加的，可能与γ-PGA含有大量侧链羧基有关。