《表1 克隆目的基因的引物》

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《Picrophilus Torridus嗜热酯酶的克隆表达及性质研究》

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按NCBI公布的Picrophilus torridus DSM 9790嗜热酯酶（NC＿005877）基因序列设计引物，引物见表1，下划线部分为引入的限制性内切酶Eco RI和Hind III酶切位点，根据细菌基因组提取试剂盒的说明提取Picrophilus torridus DSM 9790基因组DNA，以此为模板，进行常规PCR，扩增出嗜热酯酶EstPt1基因。将扩增产物与p ET 28a（+）质粒连接，构建重组质粒p Pto E，并转化到E.coli BL21（DE3）中，成功构建表达Est Pt 1基因的菌株。