《表1 目的基因的引物序列》

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《慢病毒介导BMP-2过表达质粒转染骨髓间充质干细胞联合丝素蛋白支架向成骨细胞转化的实验研究》

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细胞培养14 d后，去掉培养基，用PBS冲洗3次，加入1 ml的Trizol RNA iso（Takara，日本），提取总RNA，检测总RNA的纯度在1.9～2.0的范围，利用逆转录试剂盒进行逆转录c D-NA，4℃保存，采用20μl反应体系进行荧光定量PCR检测。采用FS2000系统进行分析，反应条件为:95℃30 s。PCR:95℃5 s；60℃30 s，40个循环。溶解曲线:95℃5 s；60℃1 min。降温:50℃30 s，1个循环。内参基因GAPDH，BMP-2引物由上海生工公司设计（表1）。采用2-△△CT的方法计算相对表达量。