《表1 qRT-PCR引物序列信息》

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《龙眼Hsf基因家族全基因组鉴定及体胚发生过程中的表达分析》


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利用DNAMAN软件设计DlHsf基因家族各成员荧光定量引物.实时荧光定量PCR参照Lin等的方法[19],分别以龙眼EF-1a、FSD和UBQ为内参基因.使用LightCycler480Ⅱ/96荧光定量PCR仪检测DlHsf基因的表达量.qRT-PCR反应体系(20μL)包含:10μL SYBR Premix Ex TaqTMⅡ(TaKaRa)、7.4μL ddH2O、0.8μL上下游特异性引物和1μL c DNA模板.反应程序为94℃预变性30 s;94℃变性5 s,退火时间30 s,72℃延伸10 s,40个循环.不同基因的退火温度(表1).利用Excel和GraphPad Prism分别进行数据分析及相关图表制作.