《表1 qRT-PCR引物序列》

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《高糖对人牙龈上皮细胞氧化应激及线粒体损伤的影响》


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细胞培养48 h后,Trizol试剂提取各组细胞总RNA,设置分光光度计波长OD260/OD280,读取OD值,计算总RNA纯度及浓度。将2μg的RNA进行逆转录合成对应的c DNA。然后以c DNA为模板,qRT-PCR检测各样本目的基因:抗氧化酶超氧化物歧化酶1(superoxide dismutase 1,SOD1),过氧化氢酶(catalase,CAT)以及谷氨酸半胱氨酸连接酶催化亚基(glutamate cysteine ligase catalytic subunit,GCLC)及内参基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)的mRNA水平,以F=2-ΔΔCt计算目的基因的相对表达量。目的基因和内参基因的引物设计见表1。