《表1 qRT-PCR引物序列》

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《肾脏细胞CD36在炎症因子诱导的脂肪酸摄取及脂质沉积中的作用》

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使用RNAiso Plus提取细胞总RNA，然后用Prime ScriptRTreagent Kit将总RNA反转录成c DNA，反转录条件是:37°C 15 min，85°C 5 s，保存于-20°C。再以c DNA为模板，实时荧光定量PCR检测基因的m RNA表达水平。使用Power SYBR Green PCR Master Mix试剂盒进行扩增，反应条件:50°C预热2 min，95°C预变性5 min；95°C变性20 s，55°C退火延伸20 s，40个循环。反应体系为25μL，用ΔΔCt计算基因的表达水平，公式如下:ΔCt=目的基因Ct值-β-actin基因Ct值，ΔΔCt=实验组ΔCt-对照组ΔCt，实验组相对于对照组基因表达水平的倍数=2-ΔΔCt。设计的引物序列见表1。