《表1 小鼠qRT-PCR引物序列信息》

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《Periostin对接触性超敏反应中的中性粒细胞调控作用的影响》

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小鼠耳朵剪碎，加入钢珠及1 mL Trizol，组织震荡匀浆仪研磨，加入氯仿0.2 mL，充分震荡，室温放置5 min，4 000×g离心15 min，取上层水相，加入等量异丙醇，室温静置10 min，4 000×g离心10 min，弃上清，75%乙醇洗2次，4 000×g离心5min，吸除乙醇，室温静置晾干，适量DEPC水溶解。逆转录试剂盒（novoprotein）合成cDNA后进行实时荧光定量PCR(qRT-PCR），反应体系包括cDNA 1μL、上下游引物各1μL、2×Mix 10μL、DEPC水7μL，引物序列如表1所示；反应条件：95℃10 min，95℃5 min，60℃30 s，72℃30 s，设置45个循环。