《表2 小鼠RT-PCR引物序列信息》
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《Periostin对心肌梗死后中性粒细胞浸润及心肌修复的调控作用研究》
心脏组织剪碎,加入小钢珠和1 ml Trizol,组织匀浆振荡器研磨后,加入200μl氯仿,充分振荡混匀15 s,室温静置10 min,4℃12 000转/分离心15 min,取上层水相,加入等量异丙醇,充分混匀,室温10 min,4℃12 000转/分离心10 min,弃上清,75%乙醇4℃8 500转/分离心5 min,室温干燥10 min,DEPC水溶解,测定RNA浓度。逆转录试剂盒(TIANGEN)合成cDNA,进行qPCR,反应体系:cDNA 3μl、DEPC水3.6μl、2×Mix 7.5μl、上下游引物各0.3μl,引物序列见表2。程序如下:94℃预变性5 min,循环程序94℃变性30 s,55℃退火30 s,72℃延伸30 s,并收集荧光信号,共40循环。
图表编号 | XD0080013600 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.05.15 |
作者 | 祝双华、廖延、姜美花、詹宇婷、彭朝权 |
绘制单位 | 中山大学附属第三医院心血管内科、中山大学干细胞与组织工程研究中心、中山大学干细胞与组织工程研究中心、中山大学附属肿瘤防治中心、中山大学附属第三医院心血管内科 |
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