《表2 q RT-PCR引物序列信息》

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《siRNA沉默ACSL1基因对秦川肉牛脂肪细胞中不饱和脂肪酸合成的影响》

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PPARγ：过氧化物酶体增殖物激活受体γ基因；SCD1：硬脂酰辅酶A去饱和酶1基因；FASN：脂肪酸合成酶基因；FABP3：脂肪酸结合蛋白3基因；FADS1：脂肪酸去饱和酶1基因；下同

按照Trizol RNA提取试剂盒说明书提取细胞总RNA，反转录为c DNA，将c DNA稀释10倍用于q RT-PCR检测。用Primer Premier 5.0软件设计AC-SL1、FASN、SCD1、PPARγ、FADS1和FABP3等基因的引物序列，由西安擎科生物公司进行引物合成，以β-actin基因作为内参基因（引物序列信息见表2）。使用TB Green TM Primix Ex Taq TMⅡ定量试剂盒，在ABI7500实时荧光定量仪（美国）上对以上各基因进行实时荧光定量PCR分析。采用20μL反应体系：SYBR?Premix Ex TaqⅡ10μL；10μmol/L上、下游引物各0.8μL；ROX Reference DyeⅡ0.4μL；c DNA模板2μL；灭菌蒸馏水6μL。反应条件为：95℃预变性30 s；95℃变性5 s，60℃退火30 s，72℃延伸30 s，40个循环。每个样本设置3个重复，结果采用2-ΔΔCt法分析基因的相对表达量。