《表1 电针后小鼠血浆外泌体circRNA差异表达基因qRT-PCR引物序列》

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《基于转录组测序技术观察电针对2型糖尿病小鼠血浆外泌体circRNA表达的影响》

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为了验证RNA-seq的准确性，随机选择10个差异表达基因进行q RT-PCR验证，引物序列见表1。RNA提取完成后用Gene Amp PCR System 9700（Applied Biosystems）将RNA逆转录为cDNA通过q PCR SYBR Green master Mix进行扩增，反应体系为10?L，反应程序具体为95℃，10 min；95℃，10 s；60℃，1 min；95℃，15 s；60℃缓慢加热至99℃（仪器自动进行-Ramp Rate为0.05℃/s）；共40个循环。以GAPDH为内参，通过2-ΔΔCT法计算基因的相对表达水平。