《表1 qRT-PCR引物序列信息》

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《石斛JmjC基因家族的鉴定及响应不同光周期的表达分析》


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利用TriPure试剂盒(Invitrogen,北京)提取金钗石斛不同组织部位及不同光周期处理材料的RNA,采用超微量分光光度计(Thermo Electron Corp,美国)检测RNA质量和浓度,OD260/280在1.8~2.0之间。参照Hifair?Ⅱ1st Strand cDoA Synthesis Kit(gDoA digester plus)(翊圣,上海)逆转录试剂盒进行cDNA合成。使用DNAMAN 6.0软件对DoJMJ成员设计qPCR引物,以18S rRNA为内参基因,引物序列见表1。使用Roche LightCycler 480荧光定量PCR仪扩增,每个样本均设置3个生物学重复,目的基因相对表达量采用2-??CT法计算,利用SPSS 22.0中的Duncan’s法对各基因成员的表达量进行显著性分析。采取Excel和GraphPad软件分别进行计算分析及图表制作。