《表1 本研究中所用引物》
采用Fast DNA Spin Kit试剂盒(Illumina公司,美国)提取土壤AM真菌DNA,按照说明书步骤进行提取。引物信息如表1所示。扩增片段大小为280 bp。PCR扩增在ABI-2720扩增仪(美国ABI公司)上进行。扩增体系:5×反应缓冲液5μL,5×GC缓冲液5μL,2.5 mmol·L-1dNTP 2μL,10μmol·L-1前、后引物各1μL,DNA模板40 ng,Q5 DNA聚合酶(NEB公司,美国)0.25μL,ddH2O补足至25μL,扩增程序:98℃预变性2 min;98℃变性15 s,55℃退火30 s,72℃延伸30 s,共30个循环;72℃终延伸5 min,10℃保存;扩增产物利用2%琼脂糖凝胶电泳检测,采用凝胶回收试剂盒(美国AXYGEN公司)对目标片段进行切胶回收。由上海派森诺生物科技有限公司Illumina Mi Seq测序平台进行双端测序分析。
图表编号 | XD0052370500 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.05.10 |
作者 | 汪志琴、马琨、王小玲、李越、魏常慧 |
绘制单位 | 宁夏大学农学院、宁夏大学西北土地退化与生态恢复国家重点实验室培育基地、宁夏大学西北土地退化与生态恢复国家重点实验室培育基地、宁夏大学农学院、宁夏大学西北土地退化与生态恢复国家重点实验室培育基地、宁夏大学西北土地退化与生态恢复国家重点实验室培育基地、宁夏大学西北土地退化与生态恢复国家重点实验室培育基地 |
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