《表1 本研究中所用的引物》
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《根际促生解淀粉芽胞杆菌SQR9对香蕉根系分泌物响应的转录组分析》
选取部分基因通过Real-time PCR对转录组结果进行验证。留取1.4节中用于委托公司进行转录组测序的少量菌悬液样品,用RNA提取试剂盒(Axygen)分别提取CK和RE处理的菌体RNA。利用反转录试剂盒(Ta KaRa)进行反转录,得到的cDNA采用核酸定量仪Thermo Scientific NANODROP 1000(NanoDrop Technologies,Wilmington,DE,USA)进行定量。Real-time PCR靶标基因和所用引物见表1。采用SYBR Premix Ex TaqTM(Perfect Real Time)试剂盒(TaKaRa),扩增仪为ABI(Applied BIO systems)PRISM7500Real-time PCR System。反应体系为20μL,包括:SYBR Premix Ex TaqTM(2×)10μL,正、反向引物(10μmol·L-1)各0.4μL,ROX reference dyeⅡ(50×)0.4μL,DNA 2μL,ddH2O 6.8μL。反应程序:95℃30 s;95℃5 s,60℃34 s,30个循环;95℃15 s,60℃1 min;95℃15 s。每个样品设3个重复,以无菌水代替模板DNA为阴性对照。实时监测并记录荧光信号的变化。
图表编号 | XD0038391500 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.01.30 |
作者 | 罗兴、冯海超、夏丽明、张瑞福、余光辉、沈其荣、张楠 |
绘制单位 | 南京农业大学江苏省固体有机废弃物资源化研究重点实验室、江苏省有机固体废弃物协同创新中心、教育部资源节约型肥料工程技术研究中心、南京农业大学江苏省固体有机废弃物资源化研究重点实验室、江苏省有机固体废弃物协同创新中心、教育部资源节约型肥料工程技术研究中心、南京农业大学江苏省固体有机废弃物资源化研究重点实验室、江苏省有机固体废弃物协同创新中心、教育部资源节约型肥料工程技术研究中心、南京农业大学江苏省固体有机废弃物资源化研究重点实验室、江苏省有机固体废弃物协同创新中心、教育部资源节约型肥料工程技术研究中心、南京农 |
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