《表1 本研究中所用的引物列表》

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《柑橘MAPK基因的生物信息及其响应溃疡病菌侵染的表达分析》

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注：Cs表示甜橙；Fj表示金柑。由于被检测基因在‘晚锦橙’和‘金弹’中非常保守，在两品种中所用引物相同，均用Cs表示；由于启动子差别大，则分别用Cs和Fj表示。

参照甜橙Cs MPK19基因序列以及甜橙和金柑中该基因的启动子序列，利用NCBI在线软件Primer-BLAST(https：//www.ncbi.nlm.nih.gov/tools/primer-blast/）设计特异性引物（表1），以‘晚锦橙’叶片c DNA为模板进行PCR扩增基因编码序列，以‘晚锦橙’和‘金弹’叶片DNA为模板进行PCR扩增启动子序列。反应条件为：95℃预变性3 min；95℃30 s，58℃30 s，72℃90 s，共30个循环；72℃10 min加A尾。电泳回收PCR产物，连接p GEM-Teasy载体，然后转化大肠杆菌DH5α进行蓝白筛选，挑取阳性克隆进行PCR验证和测序。