《表1 本研究中所用引物》

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《樟树长链脂肪酰CoA合成酶1鉴定与功能初步分析》


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于2016年4~5月份,采集樟树新鲜各组织、保存于液氮之中。通过改良的CTAB法提取total RNA(杨婕等,2015)。DNA酶纯化后采用Prime Script 1st Strand c DNA Synthesis Kit反转录试剂盒合成c DNA第一链。根据樟树叶组织转录组中候选Contig设计引物(表1),以樟树各组织c DNA为模板,PCR扩增LACS1基因片段。反应体系总体积为50μL,包括LA Taq 0.5μL、c DNA 2μL、10×LA Taq buffer 5μL、上下游引物各1μL、d NTPs 2μL和dd H2O 39.5μL。反应程序为:95℃预变性3 min;95℃30 s,54℃35 s,72℃2 min,35个循环;72℃延伸10 min。