《表2 荧光定量PCR引物序列》

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《经头孢他啶诱导产生亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌的耐药表型及其耐药机制研究》

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反转录cDNA合成:采用M-MuLV第一链cDNA合成试剂盒对提取的细菌RNA进行反转录，生成cDNA后置于-20℃备用。以cDNA稀释10倍作为模板，分别以目的基因和内参基因（见表2）作为引物进行RT-PCR，铜绿假单胞菌ATCC27853作为正常对照，反应体系为10ul体系:SYBRGreen染料5ul，上下游引物各1ul，cDNA模板1ul，ddH202ul，反应条件如下:95℃420s，95℃30s，60℃15s，72℃15s，共40各循环。相对表达量以2-ΔΔCt法表示，ΔΔCt=（Ct目的基因-Ct内参基因）实验株-（Ct目的基因-Ct内参基因）对照株。