《表1 q RT-PCR引物信息》

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《NGB和HIF-1α在牦牛间脑相关组织中的表达与定位》

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根据NCBI已收录的牦牛NGB （Gen Bank No.JQ241373.1）、牦牛HIF-1α（Gen Bank No.NM＿174339.3）、牦牛内参基因β-肌动蛋白（β-actin，Gen‐Bank No.NM＿173979.3）序列，利用Primer Premier5.0设计引物，并送往生工（上海）合成，引物信息列于表1。使用Quant Studio 5仪器进行q RT-PCR实验。反应体系（20μL）:SYBR Green Pro Taq 10μL、上下游引物（0.2μmol/m L）各0.8μL、Rox染料0.4μL、模板c DNA 2μL、dd H2O 6μL。反应参数：50℃2 min预热；95℃2 min预变性；95℃10 s变性，60℃34 s退火，40个循环。每个样品重复3次，结果取平均值，采用2-ΔΔCt定量分析法计算NGB和HIF-1αm RNA的相对表达量。