《表1 q RT-PCR引物信息》

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《藏绵羊BOLL的分子特征及其在睾丸中的表达调控与功能分析》


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用于miRNA qRT-PCR扩增的下游通用引物由生产商(Mir-XTM miRNA First-Strand Synthesis Kit,Takara,日本)提供

采用q RT-PCR技术在罗氏Light Cycler 96荧光定量PCR仪(瑞士)上对各年龄组睾丸中BOLL m RNA的表达量进行实时定量检测。以β-actin作为内参。采用两步法反应程序:95℃30 s;95℃5 s,60℃30s,共40个循环。反应体系如下:1μL c DNA,每0.4μL上下游引物(表1),10μL 2×SYBR Green Pro Taq HS Premix(艾克瑞,湖南),补充dd H2O至20μL。每个样本设计3个重复。