《表3 重组蛛丝蛋白的分子量》

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《大腹园蛛梨状腺丝重组蛋白的表达纯化与纺丝》

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重组蛋白2R与3R的理论分子量见表3。经过蛋白提纯、冻干等步骤后，重组蛋白2R与3R的平均产量为70 mg/L和66 mg/L。15%SDSPAGE检测重组蛋白（图4A和图4B）。结果显示重组蛋白2R的相对分子量稍大于45 000；3R的相对分子量接近66 200。这种目的蛋白表观分子量比理论分子量偏大的现象并不鲜见，类似现象也出现在其他蛋白的SDSPAGE结果中，如SUMO[19]、含正电荷氨基酸残基的酰基载体蛋白（ACP)[20]以及其他已报道的重组梨状腺丝蛋白[21]。造成这种现象的可能原因是蛋白内的高脯氨酸含量以及SDS与蛋白的不充分结合[21]。在图4中，诱导前（泳道2）与诱导后（泳道3）对比，表明两种蛋白均在大肠杆菌中表达。上清（泳道4）与沉淀（泳道5）相比，表明两种蛋白均存在于沉淀（包涵体）中，表明这两种蛋白在大肠杆菌内的合成速度较快，以至于不能正确折叠[22]。因此用尿素变性纯化法纯化蛋白。