《表2 各种表达载体构建引物》

《表2 各种表达载体构建引物》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《脱落酸激素诱导拟南芥幼苗中花青素的合成》


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ABI5的CDs全长为1 326 bp,编码442个氨基酸。为验证ABI5蛋白与花青素合成相关蛋白的互作关系,将ABI5的全长序列克隆到p GBKT7构建质粒BD-ABI5,参考Chen et al.(2012)构建分段质粒:BD-ABI51-164、BD-ABI5165-220、BD-ABI5165-442、BD-ABI5221-349和BD-ABI5350-442。将花青素合成相关促进因子的编码序列克隆到载体p GADT7中构得质粒AD-MYB75、AD-MYB90、AD-MYB113、AD-MYB114、AD-TT8和AD-TTG1。参考Xie et al.(2016)的方法,分别将其分段为N端和C端:MYB75的第1~122个氨基酸为N端,第123~249个氨基酸为C端,构建分段质粒AD-MYB75-N和AD-MYB75-C;MYB113的第1~123个氨基酸为N端,第124~247个氨基酸为C端,构建分段质粒AD-MYB113-N和AD-MYB113-C;TT8的第1~358个氨基酸为N端,第359~519个氨基酸为C端,构建分段质粒AD-TT8-N和AD-TT8-C;TTG1的第1~174个氨基酸为N端,第175~342个氨基酸为C端,构建分段质粒AD-TTG1-N和AD-TTG1-C。将融合于不同载体的质粒进行酵母双杂交实验。用于构建各种克隆的引物见表2。