《表1 RT-q PCR引物》

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《脱落酸激素诱导拟南芥幼苗中花青素的合成》


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采用Hu&Yu(2014)的方法所述,使用Trizol试剂(Invitrogen)从拟南芥幼苗中提取总RNA后逆转录成c DNA后进行定量实时PCR(RT-q PCR)。第一链c DNA使用具有oligo(d T)18引物的M-Mu LV逆转录酶(Fermentas,EU),在20μL反应体积中由1.5μg DNA酶处理的RNA合成。使用2×SYBR Green I master mix在Roche Light Cycler 480实时PCR仪上进行RT-q PCR (Hu&Yu,2014)。拟南芥ACTIN2基因用作基因表达的内参基因。每个样品用于RT-q PCR分析的生物学重复至少3个,且对每个生物学重复分析至少有2个技术重复。用于检测转录物的基因特异性引物见表1。