《表1 RT-q PCR引物序列》

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《龙血竭对分离自伤口感染的铜绿假单胞菌的抗菌活性研究》


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(3)实时荧光定量PCR(RT-q PCR):采用TB Green染色法,经512μg/m L龙血竭处理的铜绿假单胞菌(TL-2936m、TL-2949m、TL-3025m、TL-3088m、TL-3160m、TL-3283m和ATCC 27853m)分别以其同源的未经处理菌株为参照菌株,rsp L基因为内参基因,按照2-ΔΔCt公式计算生物膜形成相关基因psl A、pel A、alg D、alg U的相对表达水平。计算时取每个样本3个复孔的平均值,参照文献[9-10]中的引物序列,合成本实验所需的RT-q PCR引物(表1),按照实时荧光定量PCR检测试剂盒说明书设置反应体系及条件,熔解曲线分析判断产物的特异性。