《表1 RT-q PCR引物序列》
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《核内miR-199b-5p通过上调CDK9表达促进心肌细胞肥大》
ANP:atrial natriuretic peptide;MYH7:myosin heavy chain 7,encodingβ-myosin heavy chain(β-MHC);CDK9:cyclin-depen-dent kinase 9;RT:reverse transcription.
采用Trizol法提取出NMVCs中的总RNA。取1μg总RNA加入4μL 5×Prime Script RT Master Mix(含有Prime Script RTase、RNase Inhibitor、Random primers、Oligo-d T Primer和d NTP Mixture)进行逆转录,得到的c DNA后用于检测CDK9和心肌肥大标志物的m RNA表达水平(以GAPDH作为检测内参照)。取1μg总RNA,加入5μL 5×Prime Script RT Buffer、1.25μL RT Enzyme Mix和0.2μL特异RT引物进行mi RNA成熟体逆转录,得到成熟体c DNA后以U6为检测内参照检测mi R-199b-5p水平。在Vii A 7 Quantitative PCR System(Applied Biosystems)进行PCR和结果分析。以2-ΔΔCt法计算mi R-199b-5p、CDK9 m RNA和心肌肥大标志物m RNA的相对表达水平。所用引物序列见表1。
图表编号 | XD00215663600 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2021.02.25 |
作者 | 易芷瑶、赵安职、张铭、曾妮、朱杰宁、杨莹、严钰敏、郭惠明、单志新 |
绘制单位 | 华南理工大学生物科学与工程学院、南方医科大学药学院、广东省临床药理学重点实验室广东省人民医院广东省医学科学院、华南理工大学医学院、广东省临床药理学重点实验室广东省人民医院广东省医学科学院、华南理工大学生物科学与工程学院、南方医科大学药学院、广东省临床药理学重点实验室广东省人民医院广东省医学科学院、华南理工大学生物科学与工程学院、南方医科大学药学院、广东省临床药理学重点实验室广东省人民医院广东省医学科学院、华南理工大学医学院 |
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