《表1 RT-q PCR引物序列》

《表1 RT-q PCR引物序列》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《绵羊肺炎支原体对人肺泡Ⅱ型上皮细胞活性及炎症反应的影响》


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进一步选择与MO感染相关且表达上调的基因lnc RNA RP11-29G8.3-001开展基因过表达及免疫相关基因的检测。具体方法为:合成lnc RNA RP11-29G8.3-001的c DNA序列(Ensembl GRCh37.p13获得),插入腺病毒表达载体p H-BAd-EF1-MCS-CMV-EGFP-Δloxp中,重组病毒的构建及纯化由汉恒生物科技(上海)有限公司完成;将含有lnc RNA RP11-29G8.3-001表达质粒的腺病毒加入细胞融合度达到70%的人肺泡II型上皮细胞,病毒最佳MOI为100。置于细胞培养箱中孵育6 h~8 h后,利用荧光显微镜观察细胞中GFP的表达情况,然后换新鲜培养液继续培养细胞至90%以上融合后,收集细胞用于后续试验。q PCR检测lnc RNA RP11-29G8.3-001的转录水平,及lnc RNA RP11-29G8.3-001过表达后细胞中免疫相关基因HLA-B、HLA-F、HLA-C、IF16、IF127、IF135、IFITM1、IFITM3、OAS1、OAS3的转录水平(表1)。