《表1 RT-q PCR引物序列》
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《绵羊肺炎支原体对人肺泡Ⅱ型上皮细胞活性及炎症反应的影响》
进一步选择与MO感染相关且表达上调的基因lnc RNA RP11-29G8.3-001开展基因过表达及免疫相关基因的检测。具体方法为:合成lnc RNA RP11-29G8.3-001的c DNA序列(Ensembl GRCh37.p13获得),插入腺病毒表达载体p H-BAd-EF1-MCS-CMV-EGFP-Δloxp中,重组病毒的构建及纯化由汉恒生物科技(上海)有限公司完成;将含有lnc RNA RP11-29G8.3-001表达质粒的腺病毒加入细胞融合度达到70%的人肺泡II型上皮细胞,病毒最佳MOI为100。置于细胞培养箱中孵育6 h~8 h后,利用荧光显微镜观察细胞中GFP的表达情况,然后换新鲜培养液继续培养细胞至90%以上融合后,收集细胞用于后续试验。q PCR检测lnc RNA RP11-29G8.3-001的转录水平,及lnc RNA RP11-29G8.3-001过表达后细胞中免疫相关基因HLA-B、HLA-F、HLA-C、IF16、IF127、IF135、IFITM1、IFITM3、OAS1、OAS3的转录水平(表1)。
图表编号 | XD00201665600 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.10.01 |
作者 | 高力扬、张颖、陈方正、李小杰、马金成、马小明、赵琰龙、李敏 |
绘制单位 | 宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室、宁夏大学生命科学学院、宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室、宁夏大学生命科学学院、宁夏大学生命科学学院、宁夏大学生命科学学院、宁夏大学生命科学学院、宁夏大学生命科学学院、宁夏大学生命科学学院、宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室、宁夏大学生命科学学院 |
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