《表1 RT-q PCR引物序列》

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《肿瘤相关血管内皮细胞对单核细胞趋化的影响》

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用HNSCC的条件培养基将VEC诱导为肿瘤相关VEC。将THP-1细胞分为3组，使用PMA诱导THP-1贴壁为巨噬细胞，分别与正常内皮细胞、Cal27相关VEC、Fadu相关VEC共培养72 h。按Trizol说明书步骤分别提取每组细胞的总RNA，使用Primer Script Treagent Kit试剂盒将提取的纯度和完整性良好的RNA反转录成c DNA；再以c DNA为模板，使用SYBR remix Ex Taq试剂盒进行RT-q PCR。以β-actin为内参，检测白细胞介素-10(interleukin 10，IL-10）、白细胞介素-6(interleukin 6，IL-6）、白细胞介素-1β（interleukin 1β，IL-1β）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factorα，TNF-α）、精氨酸酶1(arginase 1，Arg-1）、集落刺激因子（colony stimulating factor，CSF）、趋化因子2(chemokine ligand 2，CCL2）、趋化因子5(chemokine ligand 5，CCL5）、趋化因子8(chemokine ligand 8，CCL8）、趋化因子12(chemokine ligand 12，CXCL12）、趋化因子16(chemokine ligand 16，CXCL16）的表达，引物序列见表1。采用2-ΔΔCt法计算目的基因相对表达量。