《表1 RT-q PCR引物序列》
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《Pax 1和LMX 1A在宫颈人乳头瘤病毒持续感染患者脱落细胞中的表达关系及意义》
试验于RNA无菌操作室进行,取出-80℃保存的宫颈脱落细胞,RNA提取试剂盒提取总RNA,采用Prime ScriptTMII 1st Strand c DNA Synthesis Kit反转录得c DNA。采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-qPCR)检测对宫颈脱落细胞中Pax 1和LMX 1A mRNA进行扩增。RT-qPCR反应体系共25μL:TB Green Premix Ex Taq II(Tli RNase H Plus)(2X)12.5μL,c DNA(50 ng/μL)2μL,上下游引物(10μM)各1μL,ddH2O 8.5μL。反应采用两步法,条件设置为:95℃,5 s;95℃,30 s;60℃,30 s;72℃,15 s;40个循环;添加溶解曲线。Pax 1和LMX 1A及内参GAPDH的引物序列见表1。采用2-△△CT法对宫颈脱落细胞中Pax 1和LMX 1A mRNA相对表达水平进行定量分析。
图表编号 | XD00119360300 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.01.25 |
作者 | 王立锋、陈蓓玲、朱修香、郭艳青 |
绘制单位 | 上海市闵行区中心医院妇产科、上海市闵行区中心医院妇产科、上海市闵行区中心医院妇产科、上海市闵行区中心医院妇产科 |
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