《表1 RT-q PCR引物序列》

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《法舒地尔减轻新生大鼠脑室周围白质软化的作用机制研究》


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F:forward;R:reverse.

使用常规RNA提取方法在-80℃的新鲜组织标本中提取RNA,提取结束后置于-80℃环境中保存备用。按逆转录说明书进行逆转录,得到的cDNA用DEPC水稀释10倍后备用。采用20μL反应体系,其中包括2μL cDNA模板、上下游引物(序列见表1)各2μL、10μL 2×All-in-One qPCR Mix和4μL DEPC水,混匀离心。96孔PCR板上加好样,上机检测。反应条件为:预变性95℃30 s;变性95℃5 s,退火60℃30 s,延伸72℃20 s,39个循环。每个待测样品及内参照基因均设置3个复孔。