《表1 RT-q PCR所用引物》

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向无酶八连管中加入10.0?μL的Eva Green 2×q PCR Master Mix、上下游引物(表1)各0.6?μL、2?μL的c DNA模板,加入无酶水补足至20?μL,进行反转录q PCR(reverse transcription q PCR,RT-q PCR)。扩增程序为:95℃预变性10 min;95℃变性15 s,60℃退火/延伸60 s,40个循环。每组样品(包括阴性空白对照)做3个平行。采用2-ΔΔCt计算方法计算HDC基因簇基因的相对表达量[16]。