《表1 实时荧光定量实验所用的引物序列》

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《三种植物线粒体基因低温差异表达比较分析》

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对以上筛选的部分线粒体低温差异表达基因进行实时荧光定量实验验证，检测其转录组数据的准确性。根据三种植物低温转录本的测定条件，分别对其进行低温处理，雪莲组培苗低温处理组为4℃冷驯化7 d，-2℃再处理48 h，参照组为4℃冷驯化7 d，所用雪莲为生长2个月的组培苗；拟南芥低温处理组条件为4℃处理24 h，参照组条件为18℃培养基中正常生长2周的拟南芥；番茄低温处理组条件为10℃处理48 h，参照组条件为25℃正常生长3周的番茄栽培苗。分别提取其RNA并反转录为c DNA，根据筛选出的三种植物主要的低温差异表达基因序列，设计实时荧光定量检测引物（各基因的引物序列与内参基因引物表1），进行RT-q PCR实验。分析三种植物的线粒体基因低温差异表达情况，是否与转录组中筛选的低温差异表达趋势一致。