《表1 目标RNA的PCR扩增引物序列》

《表1 目标RNA的PCR扩增引物序列》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《癌组织lncRNA H19和血清前列腺特异抗原水平与前列腺癌病理特征及预后的相关性》


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取两组患者术中切除前列腺病灶组织切片,经脱蜡等处理后采用Trizol reagent RNA提取试剂盒(美国Invitrogen公司)提取总RNA,采用实时聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测病灶组织中的lnRNA H19相对表达量,检测仪器为ABI 7500型荧光定量PCR仪(美国ABI公司),采用c DNA:Primer ScriptTMRT试剂盒将2μg RNA提取物反转录为c DNA,采用SYBR Premix Ex TaqTMqRT-PCR试剂盒进行PCR扩增,以U6为内参,目标RNA的PCR扩增引物序列见表1,采用20μl反应体系,反应条件为:95℃变性5 min,95℃30 s,60℃30 s,共反应40个循环,72℃20 s,78℃20 s采集荧光,采用熔解曲线及琼脂糖凝胶电泳对扩增产物进行分析,根据PCR反应结果计算循环阈值(Ct),采用2-△△Ct法计算目标RNA的相对表达量。