《表1 用于PCR扩增的引物序列》

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《加味四君子汤对脾虚犬小肠紧密连接蛋白表达及ERK/MAPK通路的影响》

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GenBank中查找犬ZO-1、Occludin以及内参β-actin的序列（GenBank中序列号依次为NM＿001003140.1、NM＿001003195.1和NM＿001195845.2），使用Primer Primier 5.0软件设计引物，由上海生工生物工程股份有限公司合成（表1）。取出超低温冰箱中的小肠组织样本，使用Invitrogen公司的Trizol试剂盒提取小肠各段的总RNA，按照SuperScript III RT Kit（购于ABI-invitrogen公司）说明书将提取的RNA反转录合成cDNA，Sybr qpcr mix试剂盒（购于ABI-invitrogen公司）进行荧光定量PCR试验，检测ZO-1、Occludin mRNA相对表达量。以β-actin mRNA作为内参，通过2-△△Ct法对ZO-1、Occludin mRNA相对表达量进行统计。