《表1 用于PCR扩增的简并引物》

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《烟草NBS-LRR类抗病基因同源序列的克隆及分析》

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采用3对简并引物（表1），对烟草DNA进行PCR扩增，将所得PCR产物经回收、克隆，然后进行菌落PCR筛选后测序，得到5条与已知抗病基因具有高度同源性的NBS-LRR类烟草抗病基因同源序列（tobacco resistance gene analogs，TRGA），目的片段大小均在500 bp左右（图2），与预期扩增片段大小一致。进一步分析后发现5条烟草RGAs中，有4个具有连续的开放阅读框（ORFs）和NBS功能结构域。将其提交到NCBI数据库，登录号分别为：MK634316、MK634317、MK634318、MK634319。上述结果表明，利用简并引物进行同源扩增是分离烟草RGAs的有效方法。