《表1.用于PCR扩增引物》

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《莱茵衣藻E2泛素结合酶CrUBC23调控油脂积累》

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1.5.2转基因藻株检测：将转基因单克隆藻株挑取至96孔酶标板，用200μL ddH2O混匀，用终浓度为10μg/mL的尼罗红染色10 min，酶标仪测定575 nm吸光值。根据三酰甘油标准曲线[18]计算中性油脂含量。选取3个转基因藻株，接种到HSM培养基中，每隔1 d用酶标仪（BIO-TEKElx800）测定490 nm波长处各样品的吸光值，绘制出转化子的生长曲线，每个样品做3次重复。每隔1 d取适量藻液采用酸水解法[21]（GB＿T 5009.6-2003）测定总脂含量。培养第4天，用尼罗红对藻细胞染色，在荧光显微镜下观察藻细胞生长状态及油脂情况，提取RNA，检测CrUBC23 mRNA水平。