《表1 PCR扩增的目的区域引物序列》

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《下一代测序法检测乙型肝炎病毒YMDD突变的方法学建立及性能评价》


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采用定性PCR方法对HBV P基因区进行扩增并靶向捕获。根据HBV P基因区设计引物(引物序列见表1),PCR扩增条件如下:95℃预变性15 min;然后94℃变性30 s,55℃复性30 s,72℃延伸45 s,共40个循环;最后72℃延伸7 min。采用上海生物工程有限公司的SanPrep柱式PCR产物纯化试剂盒纯化PCR扩增产物,用Qubit 3.0荧光定量仪对纯化后的核酸定量。纯化后的DNA置于-20℃保存。