《表1 本实验中涉及的引物信息》
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《小麦TaPP2-A13基因的表达响应逆境胁迫并与SCF复合体接头蛋白TaSKP1相互作用》
小写字母表示构建载体时所用酶切位点(下画线)或载体同源序列。
以小麦Tc Lr15一叶一心期的叶片c DNA作为PCR扩增的模板。自小麦转录组数据库Exp VIP(wheat expression browser,http://www.wheat-expression.com/)中挖掘到1条基因(Traes CS2D02G397700),该基因与粗山羊草Aet PP2-A13-like基因(Gen Bank登录号为XM_020331589.1)同源性高达100%,以此序列作为引物设计的模板,设计克隆引物Ta PP2-A13-F和Ta PP2-A13-R (表1)。PCR反应总体系20μL:c DNA模板1.0μL、上、下游引物(10μmol L-1)各0.5μL、2×Es Taq Master Mix 10μL、dd H2O 8μL。PCR扩增程序为94℃2 min;94℃30 s,58℃30 s,72℃1 min,33个循环;72℃10 min。扩增获得的目的片段与p MD19-T载体连接,构建p MD19-T-Ta PP2-A13质粒,然后将其转化大肠杆菌DH5α感受态细胞。菌落PCR鉴定为阳性的克隆送至北京中科希林生物科技有限责任公司进行序列测定。
图表编号 | XD00210686000 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2021.02.12 |
作者 | 孟钰玉、魏春茹、范润侨、于秀梅、王逍冬、赵伟全、魏新燕、康振生、刘大群 |
绘制单位 | 河北农业大学生命科学学院、河北省植物生理与分子病理学重点实验室、河北农业大学生命科学学院、河北省植物生理与分子病理学重点实验室、河北农业大学生命科学学院、河北省植物生理与分子病理学重点实验室、河北农业大学生命科学学院、河北省植物生理与分子病理学重点实验室、河北省农作物病虫害生物防治技术创新中心、河北省农作物病虫害生物防治技术创新中心、河北省农作物病虫害生物防治技术创新中心、河北省农作物病虫害生物防治技术创新中心、西北农林科技大学植物保护学院、旱区作物逆境生物学国家重点实验室、河北省农作物病虫害生物防治技术 |
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