《表1 本实验中所用的引物》

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《大菱鲆内脏结节病病原的分离与鉴定》

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利用细菌DNA提取试剂盒提取分离菌株的基因组，并以此为模板，利用分枝杆菌属通用引物进行套氏PCR检测。此外，分别利用引物27F和1492R[15]，Myco-F和Myco-R[16]，Hsp-F和Hsp-R[17]扩增分离菌株的16S rRNA、rpoB、hsp65基因序列（表1），PCR扩增产物切胶回收后，与PMD-18T载体连接，转E.coil TOP10感受态细胞，挑取阳性克隆进行测序，DNA测序由生工生物工程（上海）股份有限公司完成，利用NCBI数据库对测序结果进行同源性比较，并利用MEGA 4.1软件采用邻位相连法（neighbor-joining）构建系统发育树。