《表1 本实验所用到的引物》

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《斑石鲷TGF-β1基因克隆和表达分析》

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根据已经验证正确的部分cDNA序列，分别在序列两端设计RACE引物（表1）。使用巢氏PCR扩增。第一轮反应体系为10μl，使用TaKaRa LA TaqTM Hot Start Version试剂盒，按照使用说明的比例加样混合，进行Touchdown PCR程序反应。将第一轮PCR反应的产物稀释20倍作为模板，随后进行第二轮普通PCR扩增反应。反应体系为50μl，同上按照比例加样混合后进行第二轮普通PCR反应。将得到的PCR产物根据1.3.1中间片段验证的方法进行测序（Wang et al，2019）。