《表1 本实验所用引物序列》

《表1 本实验所用引物序列》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《潘那利番茄SpCPK8基因的克隆、原核表达及亚细胞定位分析》


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下划线分别为Kpn I、Xho I、Xba I、Kpn I的酶切位点。

取生长5~6周潘那利番茄根、茎、叶以及300mmol·L-1甘露醇处理1、2、5、12 h的叶片,提取植物RNA并反转录成cDNA。RT-qPCR引物(序列见表1)根据SpCPK8的CDS序列设计,以SpActin基因作为内参。用QuantiNova SYBR Green PCR Kit(Qiagen,德国)和LightCycler96(Roche,美国)进行RT-q PCR。扩增条件为:95°C 2 min;95°C 5 s,60°C30 s,共40个循环。用2-??Ct方法计算其mRNA相对表达量,并利用GraphPad Prism 8.0(GraphPad Software,美国)进行统计分析。