《表1 本实验中所用引物信息》

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《陆地棉GhrbcMT基因克隆、表达与功能初步分析》

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斜体部分为保护碱基，下划线部分为酶切位点。

从前期育性相关的转录组数据比较中，筛选得到陆地棉C312与棉花雄性不育突变体ms1花器官高丰度差异性表达基因，并将该基因序列在NCBI网站棉花基因组数据库中用BLAST工具进行序列比对，得到基因注释与序列信息为核酮糖1，5-二磷酸加氧酶/羧化酶大亚基甲基转移酶基因GhrbcMT。根据GhrbcMT基因序列，使用Primer 5.0软件设计基因特异性引物（表1），上下游引物分别位于GhrbcMT c DNA的起始密码子与终止密码子两侧，接着利用PCR技术从棉花各组织混合cDNA库中扩增出Ghrbc MT基因，测序确定。通过BioEdit、DNAstar等软件比对分析测序结果，再利用ORF Finder工具分析得到GhrbcMT cDNA序列。