《表1 本实验中所用序列信息》
合成两条单链随机序列oligo A、oligo B(表1)[24],使用碧云天退火缓冲体系合成双链随机识别文库,反应体系如下:Annealing Buffer for DNA Oligos(5×)20μL、DNA oligo A(50μmol/L)20μL、DNA oligo B(50μmol/L)20μL、Nuclease-Free Water 40μL。混匀后放入PCR仪中进行退火反应,循环参数设置:94℃预变性2 min;从94℃开始,每8 s下降0.1℃,降至25℃,变性90 min。结束后得到双链随机识别文库。使用小片段特异性核酸染料,3%浓度的琼脂糖凝胶电泳验证产物。
图表编号 | XD00160804400 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.09.01 |
作者 | 陶家康、付元帅、施志仪 |
绘制单位 | 上海海洋大学农业农村部淡水水产种质资源重点实验室、上海海洋大学农业农村部淡水水产种质资源重点实验室、上海海洋大学教育部水产遗传资源开发利用重点实验室、上海海洋大学上海水生动物遗传育种协同创新中心、上海海洋大学农业农村部淡水水产种质资源重点实验室、上海海洋大学教育部水产遗传资源开发利用重点实验室、上海海洋大学上海水生动物遗传育种协同创新中心 |
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