《表1 本实验中所用序列信息》

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《牙鲆变态中甲状腺激素调控的靶基因》


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合成两条单链随机序列oligo A、oligo B(表1)[24],使用碧云天退火缓冲体系合成双链随机识别文库,反应体系如下:Annealing Buffer for DNA Oligos(5×)20μL、DNA oligo A(50μmol/L)20μL、DNA oligo B(50μmol/L)20μL、Nuclease-Free Water 40μL。混匀后放入PCR仪中进行退火反应,循环参数设置:94℃预变性2 min;从94℃开始,每8 s下降0.1℃,降至25℃,变性90 min。结束后得到双链随机识别文库。使用小片段特异性核酸染料,3%浓度的琼脂糖凝胶电泳验证产物。