《表1 本研究中的引物信息》

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《转GmWRKY70基因大豆的PCR检测及其T-DNA侧翼序列分析》

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利用引物Primer Premier v5.0软件，根据植物表达载体p FGC5941的T-DNA序列，设计了用于选择性标记基因检测的引物p FGC5941-434（Bar）-F和p FGC5941-866（Bar）-R，以及用于载体构建特异性分析的p FGC5941-F和p FGC5941-R。合成了分别位于Gm WRKY70第一外显子和第二外显子上的引物W70-F和W70-R，与p FGC5941-R或p FGC5941-F结合进行靶基因检测和载体构建特异性分析。根据Liu和Chen （2007）的Hi-TAIL PCR流程，合成了LAD系列引物、RB系列引物和AC1引物（表1）。用扩增的基因组DNA （用于预扩增）或100倍稀释的PCR产物（用于一级和二级Hi-TAIL PCR）作为PCR模板。引物RB-0b与LAD1-1-LAD1-4配对（在预扩增中），RB-1b与AC1配对（在一级扩增中），RB-2b与AC1配对（在二级扩增中），分别用于3轮HiTAIL PCR扩增。