《表1 本研究所用引物信息》

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《普通小麦TaGNOM1的分子鉴定和表达分析》


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利用DNAMAN软件对TaGNOM1基因序列进行比对,设计qPCR引物。以制备好的cDNA为模板进行Real-time PCR扩增。具体参照SYBR Premix Ex TaqTM II(TaKaRa,Shiga,Japan)试剂盒操作说明进行。10μL的反应混合物包括:2×SYBR Green II混合物5μL,上下引物0.5μL,cDNA 100 ng,ddH2O 3μL。反应程序为:95℃预变性30 s;95℃持续5 s,60℃持续30 s,40个循环;95℃持续15 s,60℃持续1 min,95℃持续15 s。以β-actin基因(表1)作为参考。