《表1 本研究所用的引物信息》
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《黄颡鱼Pelteobagrus fulvidraco AMH基因的克隆鉴定及表达》
全长序列的扩增引物设计来源于NCBI中已发布的近缘物种斑点叉尾Ictalurus punctatus的AMH序列(XM_017477698)(表1) 。扩增反应所用模板分别为总RNA经反转录所得c DNA及提取纯化的DNA。每个PCR反应体系为50μL,包含25μL的2×Es Taq Master Mix(Dye)(康维世纪) 、10μM的上下游引物各2μL和1μL的模板,用dd H2O补足至50μL。PCR扩增条件为:94℃预变性5min;扩增35个循环,每个循环94℃变性30s、60℃退火60s、72℃延伸90s;72℃终延伸15min。PCR扩增产物经1%的琼脂糖凝胶电泳后,用Axygen胶回收试剂盒纯化。纯化产物连接至p MD19-T载体(Ta Ka Ra),并转化至DH5α感受态细胞(Ta Ka Ra)。挑选阳性单克隆经PCR验证后,送至金唯智生物公司测序。
图表编号 | XD0073557400 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.06.20 |
作者 | 王乐、程磊、王秋实 |
绘制单位 | 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所、中国水产科学研究院黑龙江水产研究所、中国水产科学研究院黑龙江水产研究所 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |