《表1 本研究设计引物信息》

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《利用BAC/gal K系统构建缺失潜伏相关转录物启动子LAP1的伪狂犬病突变病毒》


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含绝缘子cHS4序列的pUC57载体,由金唯智生物科技公司合成。根据已发表的伪狂犬病病毒JS-2012基因组序列(GeneBank登录号:KP257591.1),设计缺失启动子LAP1的左右同源臂L1和R2引物:LATL1F/LATL1R、LATR2F/LATR2R。结合载体pGalK序列,设计扩增含同源臂的galK引物:LatgalKF/LatgalKR;设计正筛选检测galK是否成功插入SW102-BAC中的引物:LatDF/LgalKdown;设计检测负筛选是否成功的引物:PL1F/PR2R。根据LLT的ORF1和ORF2序列设计RT-PCR的引物:LLT-ORF1-RT和LLT-ORF2-RT,检测ORF1 cDNA的引物:651F/946R,以及检测ORF2 cDNA的引物:393F/697R。以上引物均由上海桑尼生物科技有限公司合成(表1)。