《表1 mi R-222、内参U6引物序列及扩增片段》

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《慢病毒介导miR-222稳定沉默结肠癌细胞系的构建及其生物学作用》


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分别收集已成功培养Ca CO2、HTC-15、HT-29、HCT-116、sw480、sw620结肠癌细胞(1×106)。RT-PCR步骤如下:总RNA抽提→去基因组→总RNA纯度和完整性检测→逆转录→定量PCR。PCR反应条件为:95℃5 min;95℃15 s,60℃32 s读板,40 cycles;熔解曲线分析:温度60~95℃。委托上海生工技术有限公司合成mi R-222、内参U6引物序列(表1)。