《表1 miR-27及内参U6的引物序列》

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《脂肪干细胞来源外泌体携带miR-27抑制白色脂肪的棕色化》

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慢病毒上清感染293T细胞，分为3组：对照组（不进行感染）、空载体组（加入空载体）及慢病毒过表达组（加入构建的过表达miR-27载体），48 h后在荧光显微镜下观察转染效率，以转染效率最好的病毒液浓度作为最佳的病毒转染滴度，计算病毒滴度=病毒颗粒数/病毒原液量。培养生长良好的ASC细胞24 h后，取病毒液以最佳滴度感染ASC，培养48h后收集培养液，提取获得过表达miR-27的外泌体。提取总RNA，利用qRT-PCR检测miR-27的表达量。按表1序列进行引物构建，反应过程：95℃预变性3 min；95℃5 s，56℃10s，72℃25 s，39个循环；72℃延伸7 min。