《表1 研究中所用引物序列》
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《小麦F-box/Kelch类基因TaFKOR23的抗逆相关表达模式及分子互作蛋白鉴定》
以普通小麦D基因组供体种粗山羊草(Aegilops tauschii Coss)中的F-box/Kelch-repeat protein OR23(LOC109739403)序列为模板设计引物(表1),以Tc Lr15的cDNA为模板,通过RT-PCR方法获得TaFKOR23基因编码区全长。PCR反应体系:10×Taq Buffer 2.5μL,正向引物(10μmol/L)0.5μL,反向引物(10μmol/L)0.5μL,cDNA模板(860 ng/μL)1μL,Taq DNA Polymerase(1.25 U/μL)0.5μL,加ddH2O至25μL。扩增程序为:94℃预变性3 min,94℃变性30 s,56.4℃退火30 s,72℃延伸1 min,35个循环,72℃延伸10 min。1%琼脂糖凝胶电泳检测扩增结果。预期扩增片段经凝胶回收试剂盒纯化后与pGEM T-easy载体(Promega)连接。连接产物转化E.coli DH 5α感受态细胞,挑取白色单克隆进行质粒提取和酶切检测,然后选取阳性克隆进行序列测定。测序委托北京中科希林生物科技有限责任公司进行。
图表编号 | XD00181540000 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.05.16 |
作者 | 魏春茹、孟钰玉、范润侨、赵梦伊、于秀梅、赵伟全、康振生、刘大群 |
绘制单位 | 河北农业大学生命科学学院、河北省植物生理与分子病理学重点实验室、河北农业大学生命科学学院、河北省植物生理与分子病理学重点实验室、河北农业大学生命科学学院、河北省植物生理与分子病理学重点实验室、河北农业大学生命科学学院、河北省植物生理与分子病理学重点实验室、河北农业大学生命科学学院、河北省植物生理与分子病理学重点实验室、西北农林科技大学植物保护学院、旱区作物逆境生物学国家重点实验室、河北省农作物病虫害生物防治技术创新中心、河北省农作物病虫害生物防治技术创新中心、西北农林科技大学植物保护学院、旱区作物逆境生物 |
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