《表1 本试验中所用引物序列》

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《枣TCP家族基因鉴定及其表达分析》


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采用天根公司多糖多酚植物总RNA提取试剂盒DP441,根据说明提取枣材料总RNA,采用全式金公司Trans Script First-Strand cDNA Synthesis SuperMix AT301试剂盒,按说明进行反转录。设计枣TCP基因引物(表1),进行半定量和实时定量表达分析,以Actin基因作为内参(其上游引物序列为:5′-GCGAGCTTCCCTGTAGGTA-3′,下游引物序列为:5′-CGAACCCAGCCTTCACCATAC-3′[15])。PCR程序为:95℃预变性10 min,95℃变性10 s,58℃退火35 s,72℃延伸35 s,40个循环,于72℃,55 s处收集荧光信号。基因相对表达计算采用2–ΔΔCT方法。