《表1 桃蚜钠离子通道基因克隆所用引物》

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《桃蚜电压门控钠离子通道基因cDNA克隆及其生物信息学分析》

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根据NCBI序列，利用Primer 5.0软件设计特异性引物（表1）进行PCR扩增，引物R1和引物R2用于扩增MpNav-I，引物R3和引物R4用于扩增MpNav-II，分离得到多个重叠片段。PCR反应在50μL体系中进行，每个反应包含c DNA模板1μL、dNTP Mix（10 mmol/L Meach）1μL、Phanta Max Super-Fridelity DNA Polymerase 1μL、上游引物2μL、下游引物2μL、ddH2O 18μL、2X Phanta Max Buffer 25μL。PCR扩增条件：预变性温度94℃，时间3 min；变性温度94℃，时间30 s；复性温度56.5℃，时间15 s；延伸温度72℃，时间4.5 min，共32个循环。延伸温度72℃，时间8 min。